Набор для экстракции бактериального белка B-PER, Thermo FS, 90078
Предлагаем к покупке Набор для экстракции бактериального белка B-PER, Thermo FS, 90078. На рынке медицинского оборудования компания ЛидерМед Групп уже более 10 лет! С нами сотрудничают как крупные государственные учреждения, так и частные международные клиники. Среди наших поставщиков ведущие производители медоборудования с многолетней историей, опытом и надежной репутацией. Вся продукция лицензирована и сертифицирована в соответствии с установленными требованиями.
Набор для экстракции бактериального белка B-PERобеспечивает мягкую экстракцию белков из бактерий (E. coli) без необходимости механического повреждения клеток. Набор может быть использован для выделения растворенных белков и телец включения из бактериальных клеточных лизатов. В состав набора входит реагент для экстракции бактериального белкаB-PER, лизоцим и ДНКаза I, что позволяет выделять белки большого молекулярного веса (более 70 кДа) и белки экспрессирующиеся в тельцах включения. В зависимости от применения, добавочные компоненты: ингибиторы протеаз, соли, восстанавливающие агенты могут быть добавлены к реагенту.
Важная информация о продукте:
- B-PERэкстрагирует белки из свежих и замороженных клеток. Обычно экстракция более эффективна из замороженных клеток. Количество реагента зависит от количества клеточной пасты. Если необходимо, добавьте ингибиторы протеаз не содержащие ЭДТА, соли, и восстанавливающие агенты прямо в реагент.
- добавьте лизоцим и ДНКазу I кB-PERреагенту для более эффективной экстракции белка. Экстракция некоторых сверхэкспрессированных белков не требует добавления лизоцима;
- если добавление лизоцима и ДНКазы I может помешать последующему применению, использование этих ферментов следует исключить;
- реагентB-PERэффективно экстрагирует растворимые белки из распространенных бактериальных штаммов и особенно подходит для штаммов BL21 с дефектной протеазной экспрессией. Если лизис клеток проходит неэффективно для определенного бактериального штамма, заморозьте клетки перед экстракцией;
- лизаты цельных клеток, приготовленные с помощью реагентаB-PER, совместимы с последующими приложениями, такими как количественное определение белка методом BCA или методом Брэдфорда.
Протокол экстракции белка из бактериальных клеток:
- осадите бактериальные клетки центрифугированием при 5000 g в течении 10 минут;
- если необходимо, добавьте 2 мкл лизоцима и 2 мкл ДНКазы I на 1 мл реагентаB-PER. Добавьте ингибитор протеаз не содержащий ЭДТА;
- добавьте 4 мл реагентаB-PERна каждый грамм осадка клеток. Суспендируйте пипетированием;
- инкубируйте 10-15 минут при комнатной температуре;
- центрифугируйте лизат при 15000 g в течении 5 минут для отделения растворимых и нерастворимых белков.
Примечание:Если огромное количество сверхэкспрессированного белка остается в осадке, выделяемый белок может экспрессироваться в тельцах включения. В этом случае, либо используйте реагент для очистки телец включений (арт. 78115), либо измените условия экспрессии белка для минимизации образования телец включения.
Проблемы при выделении, причины и решения:
Проблема | Возможная причина | Решение |
Выделяемый белок не растворяется | Выделяемый белок экспрессируется в тельцах включения | Измените условия экспрессии белка или используйте реагент для солюбилизации телец включения. |
Добавьте лизоцим и ДНКазу I к реагентуB-PER | ||
Бактериальные клетки не лизируются при добавлении фермента | Температура слишком низкая | Подогрейте клеточную культуру и остальные реагенты до комнатной температуры |
Лизоцим имеет низкую активность или неактивен | Добавьте больше лизоцима кB-PERреагенту или купите новый фермент. | |
Высокая вязкость клеточного экстракта | ДНКаза I имеет низкую активность или неактивна | Добавьте больше ДНКазы I кB-PERреагенту или купите новый фермент. |
Добавьте Mg2+до конечной концентрации 2 mM | ||
Сверхэкспрессированный белок остается в осадке | Только реагентB-PERне может перевести белок в растворенное состояние | Добавьте лизоцим и ДНКазу I кB-PER |
РеагентB-PERмутный после доставки | Реагент холодный | Нагрейте реагент до комнатной температуры |
Состав набора B-PER:
- B-PERреагент для экстракции бактериального белка, 250 мл;
- лизоцим, 0.5 мл 50мг/мл;
- ДНКаза I, 0.5 мл, 2500 ед/мл.
Сопутствующие товары Thermo Scientific:
- 78990 Реагент для экстракции белка из дрожжей Y-PER, Thermo FS;
- 89802 Реагент для экстракции белка из клеток насекомых I-PER, Thermo FS;
- 78505 Реагент для экстракции белка из культивируемых клеток млекопитающих M-PER, Thermo FS;
- 78510 Реагент для экстракции белка из тканей T-PER, Thermo FS;
- A44056 Реагент для экстракции суммарного белка из растений Pierce Plant, Thermo FS;
- 89802 Реагент для экстракции белка из насекомых I-PER, Thermo FS;
- 78115 Реагент для очистки телец включений, Thermo FS.
Информацию о данной продукции можно получить по запросу.
Вы можете купить Набор для экстракции бактериального белка B-PER, Thermo FS, 90078 уже сегодня, связавшись с персональным менеджером по указанному номеру телефона или через почту. Вас обязательно проконсультируют по любым выбранным товарным позициям и помогут подобрать оптимальный вариант. Также рады сообщить, что доставка осуществляется по территории всей России и ближнего зарубежья. При необходимости опционально доступна поставка и установка дополнительного оборудования. После покупки предоставляется сервисное и гарантийное обслуживания.
Гарантия
По вопросам гарантии и сервиса обращайтесь по адресу lider@biomedgroup.ru. Подробная информация на странице Гарантия.
Доставка
По вопросам, связанным с оплаченными счетами на отгрузку и доставку продукции в Нижнем Новгороде, РФ и СНГ, звоните по общему телефону или пишите в отдел сопровождения заказов: lider@biomedgroup.ru. Подробная информация на странице Доставка.